篇一：药理实验方法学重点16
药理实验方法学
1.白细胞分化抗原群的检测方法P170
答：(1)免疫组化技术 先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成的有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。
(2)免疫荧光技术 根据抗原抗体反应的原理，现将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。
(3)流式细胞技术 使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微利捉个通过样品池，同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表向前散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号，经计算机处理形成相应的点图，直方图和加三维结构图像进行分析。
2.分析白细胞分化抗原检测的影响因素
流式法检测的影响因素：（1）非特异性结合NSB①Fc受体结合抗体是导致影响检测结果的重要因素，任何细胞上只要存在未结合的Fc受体，都可能有NSB。采用高浓度的纯化IgG可用于阻断Fc受体的NSB。②免疫球蛋白聚集可增加NSB。由于冰冻、复溶和冻干处理，抗体均可出现聚集。对于新购买的抗体，可通过高速离心去除聚集。
3.简述实验动物血压测定的方法。P140
一、直接测定法 1.麻醉动物直接测定法（1）麻醉动物直接测定法：麻醉、固定动物、手术视野剪毛、气管插管、动脉插管、血压记录；清醒动物直接测定法（2）简易清醒自由活动大鼠血压测定技术：导管制作、手术操作、连接测压系统、记录血压（生理记录仪记录）：
（3）计算机化清醒自由活动大鼠血压测定技术：①采样 、记录和储存：压力信号经换能器转换为电信号，再经放大器输入计算机。②数据处理和结果分析：（4）清醒自由活动大鼠血压遥控测定技术 二、间接测定法 1.容积测定法 （1）大鼠尾容积测定法 大鼠尾根部加压超过收缩压时，血流中断，当压力降低到等于或稍低于收缩压时，血液流入尾部，此时的压力大于静脉压，血液回流受阻，结果尾容积加大，测定该容积突然增加时的瞬间压力，即为收缩压：（2）大鼠足容积测定法 同上；2..脉搏测定法 （1）大鼠尾动脉脉搏测定法 大鼠尾根部加压超过收缩压时，脉搏消失，压力减至收缩压时，脉搏出现，继续减压之舒张压时，脉搏回复加压前水平，检测这种脉搏变化时的瞬间压力，即得血压值。（2）犬颈动脉脉搏测压法 同上；（3）犬胫动脉脉搏测压法 同上（4）犬尾动脉脉搏测压法 同上
4.简述肾外包扎性高血压模型制备的基本原理和注意事项。P144
原理：肾外异物包扎，可致肾周围炎，在肾外形成一层纤维素性鞘膜，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素形成增加，进而使血液中血管紧张素含量增加，血压上升。
注意事项：（1）肾外包扎材料除自制双层乳胶薄膜和玻璃纸外，还可用绸布、乳胶、火棉胶等材料。肾外包扎材应足够紧，但不能勒破组织。（2）如果要制造2肾1扎型，则一侧肾包扎后无需切除另一侧肾，术后3~6月10%~20%动物形成高血压。如果要制造2肾2扎型，则一侧肾包扎后同法包扎另一侧肾，术后3~4周70%以上动物形成高血压。
5.试述区分中枢降压与外周降压的试验方法。P145
（1）脊髓猫实验 将猫在第二颈椎水平切断脊髓，施行人工呼吸，随后切断两侧迷走神经。如果给药后仍有降压作用，提示作用部位不在中枢，而在外周。如果给药后原有的降压作用消失，提示作用部位在中枢。
（2）降压有效量比较实验 如果以静脉注射最小有效降压计量的1/10量作椎动脉注射或侧脑室注射，仍可引起降压效应时，则可推测该受试药物降压作用为中枢性，否则尾外周性。
（3）交叉灌流实验 通过交叉灌流实验记录受血动物的血压及交感神经活动来分析药物的中枢性心血管作用。受血动物的头部血供由另一供血动物提供，在供血动物注射药物后，若
药物通过中枢发挥作用，则受血动物会立即出现类似供血动物的心血管效应和交感神经活动的改变。
6.发热模型的建立与评价
1.基本原理：发热反应大多是各种致热因子作用于机体，产生和释放内热原，并进一步影响体温调节中枢，使调温起步点提高，体温相应升高。因此，实验室常用有关的刺激因子激活产生内热原。操作方法：1测量体温，系将肛表涂上凡士林，使其润滑后插入动物肛门，兔一般插入3-4cm，大鼠插入2cm，放置3-5min后取出读数。2.引起发热反应包括（1）细菌培养液和内毒素引起的发热。①注射杀死的大肠埃希菌或乙型副伤寒沙门菌培养液②注射伤寒-副伤寒菌苗③注射腐败干草浸剂④注射大肠埃希菌菌液⑤注入伤寒沙门菌内毒素⑥应用啤酒酵母悬液（2）非感染性发热复制法1）化学刺激法：给兔背部注射松节油0.4ml/kg或2%2,4-二硝基酚乙醇溶液亦用1%角叉菜胶0.1ml，于大鼠一侧后足趾皮下注射2）注入异性蛋白给兔肌注10%蛋白栋，剂量1.0g/kg，可在2-3h内引起体温显著升高3）温刺激法（3）实验性发热反应的影响因素①动物特点的影响：不同种属、年龄和形态特征，对发热有明显影响②实验环境温度的影响：实验环境的温度能明显影响发热的反应速度和强度③实验动物活性的影响：体温实验时，必须考虑到动物的活动情况④致热物质的注入量和注射部位。
7.痛反应标准
1、 刺激强度和部位明确；2、有痛感觉产生的潜伏期；3、反应优先发生于伤害性刺激痛觉
感受范围内，可根据刺激强度对反应分级；4、痛反应的量化值必须能反应镇痛药的量效关系。
8.疼痛模型建立方法
1、化学刺激法：小鼠扭体法，钾离子皮下透入法，缓激肽动脉注射法，福尔马林实验
2、热刺激法：辐射热刺激法，小鼠热板法，小鼠热水缩尾法；
3、机械刺激法：大鼠尾尖部压痛法，小鼠尾根部加压法，后肢加压法（大鼠压足法）
4、电刺激法：1.大鼠牙髓刺激法 2.电刺激大鼠甩尾法
9.慢性疼痛模型
慢性疼痛法：1.大鼠关节炎痛 2.神经源性疼痛 3.坐骨神经痛 4.癌痛模型
10.镇痛药物作用部位分析
基本原理：1）微量给药，直接给药部位达有效浓度，而经血流稀释分布至其他部位时则浓度太低而无效；2）阻断或改变血流使药物不能进入某一部位或只能到达某一部位；3）切断部位之间解剖学联系；4）造成对称肢体痛阀差别，根据差别与部位的关系分析药物的作用部位。
1、 外周疼痛模型：大鼠单足致炎法（中枢和外周疼痛模型），大鼠诱发肌电法，痛介质诱
发隐神经传入放电法，兔耳静脉阻断法
2、中枢疼痛模型：清醒小鼠鞘内注射（脊髓），大鼠蛛网膜下腔插管法（脊髓），侧脑室
给药法（中枢），脊髓化鼠模型（中枢），大鼠单足致炎法（中枢和外周）。
11.肝纤维化动物模型
1、CCL4诱发的肝纤维化动物模型原理CCL4P450酶?肝????CCL.
3+ CL 启动脂质过.
氧化作用损伤肝细胞操作：SD大鼠、CCL4、花生油（高压灭菌）分组：正常组、模型
组、不同剂量的受试药物组、阳性对照药组 背部皮下注射CCL42、异种血清诱发
的肝纤维化动物模型 原理：异种血清进入动物体内引起免疫应答形成抗异种血清的抗体，长期刺激产生的免疫复合物来不及清除，沉积于肝脏的血管壁内外。操作：wistar雄大鼠、
猪血清分组：同上 每只腹腔注射，，每次注0.5ml,每周2次，16周?给药组给予相应药物?血清，肝脏指标检查3、胆总管结扎致肝纤维化动物模型4、乙醇诱导的肝纤维化动物模型5、二甲基硝胺诱导的肝纤维化动物模型6、复合因素建立的肝纤维化动物模型
12.人外周血、DC分离培养及鉴定方法
培养流程：1、静脉新鲜抗凝血50ml 2、密度梯度离心获得单个核细胞 3、接种至6孔平底培养板中，置37度，5%二氧化碳培养箱吸弃细胞悬液，获得贴壁的单核细胞4、分离成功的单核细胞于每孔加入10%胎牛血清的1640完全培养基，重组人GM-CSF20ng/ml和IL-4 20ng/ml，于培养第3天半量换液同时加入全量细胞因子，于培养第5天全量换液，加入全量细胞因子，于培养第七天收获。鉴定方法：
13.要进行某药物的药效试验，观察其对血压的影响，应分别选用何种实验动物为好？ 不能选择哪种动物？为什么
血压研究常用实验动物为大鼠、犬和猫，一般不宜使用兔作为血压实验，因为兔血压易波动，对药物反应与人相差较大。
14.MTT、CCK-8检测细胞增殖的基本原理和操作步骤
MTT法原理：活细胞线粒体酶还原成黄色，MTT为显蓝色的不溶于水的甲臜，死细胞此现象消失，MTT不被还原；DMSO溶解甲臜后，可通过酶标仪在参考波长450nm，检测波长570nm处测定其吸光度（OD值）。吸光度值与活细胞数成正比，因此可根据OD值推测出活细胞的数目，了解药物一直或杀伤肿瘤细胞的能力。 操作步骤：称取一定量MTT，加PBS或无血清培养基配置，用0.22um滤膜过滤，5mg/mlMTT液避光保存。接种细胞→24h→
溶剂对照组/待测实验组（五个稀释浓度）→培养结束前4h→每孔加MTT溶液20ul→37度孵育4h，吸弃上清→加DMSO→测定570nm OD值
计算:抑制率=[（对照组OD均值—给药组OD均值）/对照组OD均值]*100%
cck-8法原理：类似于MTT化合物，在电子耦合剂存在的情况下，可被线粒体脱氢酶还原成黄色的水溶性甲臜，生成甲臜数量与活细胞数成正比，活细胞增殖越快，颜色越深；细胞毒性越大，颜色越浅。操作：接种细胞于二氧化碳环境中培养24h→溶剂对照组/待测实验组（5个稀释浓度）→没空加cck-8溶液10ul→37度培养1至4小时→450nm处测OD值和计算抑制率。优点：1、加入cck-8可直接测定OD，简单方便，同时减少误差，尤其适用于悬浮细胞的培养。2、由于CCK-8量加入少，建议加完后轻敲培养板混匀。3、细胞种类不同，形成Formazan量也不同，如果显色不够可以继续培养。
15.Transwell侵袭实验的基本原理、操作步骤
原理：肿瘤侵袭基地膜被认为是转移发生过程中的一个重要环节，肿瘤细胞最初穿过基底膜是他们侵入淋巴系统或血床的开始，随后肿瘤细胞通过血行散播或淋巴转移进入靶器官/组织，最终形成转移灶。Matrigel是从一种富含细胞外基质蛋白的小鼠Engelbreth-Holm-Swarm肉瘤中提取的可溶性的基底膜。它主要包含层黏连蛋白IV型胶原、硫酸类肝素蛋白多糖等多种基底膜组分。
操作步骤：1)Matrigel胶包被小室的制备；2）胰酶消化法从培养瓶中获取细胞，用含1%FBS的培养基重悬细胞，使细胞浓度达到（1~5）×105个/ml；3）Matrigel侵袭分析；4）结晶紫染色法收集下室细胞，并统计迁移到下室的细胞数。
16请以豚鼠肺支气管灌流方法为例简述肾上腺素和苯海拉明的药理作用机制差异
基本原理：离体肺支气管灌流是通过观察药物对灌流液流出速率的影响，借以测定全部气道平滑肌的张力情况。若使灌流液流量增加，说明气道平滑肌张力减低，即该药有扩张平滑肌的作用。机制：（1）组胺激动H1受体和乙酰胆碱激动M受体都可导致平滑肌收缩。（2）苯海拉明对抗组胺H1受体竞争对平滑肌的影响不大。（3）异丙肾上腺素对抗乙酰胆碱和组胺对平滑肌的收缩作用是药理性对抗，作用比苯海拉明好。
17.简述肝微粒体的制备步骤
SD大鼠5只，实验前禁食12h，将大鼠断头处死，自门静脉注入0~4℃冰冷的磷酸盐缓冲液中，冲洗肝脏至土黄色，迅速取肝，再用磷酸盐缓冲液冲洗干净，称重。将肝组织剪碎，加入一定体积的0.1M磷酸盐缓冲液，于冰水浴中匀浆，并于4℃9000×g离心20min，取上清。此时上清即为S9部分。取该上清液，于100000×g离心60min。得下层沉淀即为肝微粒体，将沉淀物悬浮于含30%甘油的磷酸盐缓冲液，微粒体置-80℃冰箱内保存。
篇二：药理学小学期实验论文
药理学小学期实验论文
学校：石河子大学 学院：药学院
班级：2011级药学1班
学号：2011515026
姓名：陈茂琴
指导老师：马建慧 曹亚军
元胡止痛片对小鼠镇痛抗炎镇痛活性研究
组员：张礼杰 信盼 陈茂琴 何朵朵 杨森 冯禹 王同月 指导老师:马建慧 曹亚军 石河子大学药学院
摘要：目的：研究元胡止痛片是否具有镇痛抗炎的效果。 方法：使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳肿胀法，并分别建立小鼠的镇痛抗炎模型，观察元胡止痛片对小鼠的镇痛抗炎作用的影响。 结果：1.热板法：元胡止痛片对小鼠热板法实验中给药60分钟后有显著性差异，阳性药阿司匹林与生理盐水组相比有明显的痛阈降低，低浓度与生理盐水组相比有痛阈降低。2. 醋酸扭体法：实验结果有显著差异，阿司匹林阳性药与高浓度元胡溶液相比有显著性差异，阳性药有明显的镇痛作用。而阿司匹林组与生理盐水，低浓度与生理盐水组没有出现显著性差异。3. 热肿胀法：结果显示无显著性差异，阳性药阿司匹林没有明显的抗炎活性。 结论：阿司匹林阳性药有抗炎镇痛作用，元胡止痛片无抗炎镇痛作用。
关键词：元胡止痛片；镇痛；抗炎；热板法；醋酸扭体法；耳肿胀法
元胡止痛片为中药复方制剂，由延胡索(醋制)、白芷等中药组成，延胡索(醋制)具辛、苦、温，归肝脾经，由活血、理气、止痛等功效；白芷辛温，归胃、大肠、肺经，其功能与主治为散风除湿、通窍止痛、消肿排脓。该制剂为中国药典方，临床上用于气滞血淤的胃痛、胁痛、头痛及月经痛等。由于直肠给药50％以上的药物可以不通过肝脏而直接进入血液作 用于全身，可避免口服引起的胃肠道刺激，同时减少。胃液和肝脏对药物的破坏和降解，从而提高药效减轻药物的不良反应。另外，直肠给药药物吸收缓慢，可使药效维持较长的时间。本实验旨在对元胡止痛栓的镇痛抗炎作用的研究[1]。
1 材料与方法
1.1 动物 健康昆明种小白鼠，体重25±8g，雌性32只，雄性32只。健康昆明种小白鼠，体重40±10g，雄性，32只。
1.2 药品与试剂 元胡止痛片，广西半宙天龙制药有限公司，批号130807；0.9%氯化钠注射液，新疆华世丹药业股份有限公司，批号214070702；阿司匹林肠溶片，临汾宝珠制药有限公司，批号140401；二甲苯，天津市富宇精细化工有限公司，批号120411；冰乙酸，天津市光复科技发展有限公司，批号090527。
1.3 仪器 YLS-6B智能热板仪，淮北正华生物仪器设备有限公司，出厂日期071018；天孚牌JYT-5架盘药物天平，生产日期2011年8月；YLS-25A电动耳肿打耳器，济南益延科技发展有限公司，出厂日期20140521；电子天平。 2 实验内容
2.1 热板法
2.1.1 动物筛选 致痛潜伏期 (痛阈值)为 5~45s 之间的合格雌性小鼠。32只，热板法镇痛试验，筛选痛阈值合格的小鼠，取♀小鼠于给药前先用热板仪于55 ± 0.5 ℃ 分别测定每只小鼠的正常痛阈值［将小鼠放于智能热板仪上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值( s) ，连续2次，间隔30 s，测定平均值即为正常痛阈值］。将舔后足时间 ＜ 5 s 或 ＞45s，或跳跃者不用于此实验。
2.1.2 分组 按体重随机分组，分4组，编号，每组8只。
2.1.3 给药 1组生理盐水空白对照组（按0.1mg/10g灌胃生理盐水），2组阿司匹林阳性对照组（按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林），3组元胡止痛片低剂量组（按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液），4组元胡止痛片高剂量组（按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液）。
2.1.4 测定痛阈值 各鼠给药前测定正常痛阈值。取智能热板仪，调节温度，使温度恒定在
55±0．5℃,取每组合格雌性小鼠，按2.1.2灌胃不同药液，测定给药后每组15、30、60、90分钟后各鼠痛阈值。 2.1.5 痛阈提高百分率
用药后平均热痛阈值—用药前平均痛阈
痛阈提高百分率用药前平均痛阈值
2.2 耳肿胀法
2.2.1 分组 取雄性小鼠25±8g，32只，随机分为4组，编号，每组8只。
2.2.2 给药 1组生理盐水空白对照组（按0.1mg/10g灌胃生理盐水），2组阿司匹林阳性对照组（按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林），3组元胡止痛片低剂量组（按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液），4组元胡止痛片高剂量组（按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液）。
2.2.3 测量：每组给药30分钟后，给小鼠的右耳前后涂上二甲苯0.1ml/只，30分钟后处死小鼠，沿耳廓对称剪下两只耳壳，用YLS-25A电动耳肿打耳器取耳片，称重，以两耳重量差计算肿胀度。 2.2.4 计算肿胀率
肿胀率（%）=[右耳片重（mg)-左耳片重（mg)]/左耳片重（mg)×100％ 2.3 醋酸扭体法
2.3.1 分组 取雄性小鼠40±10g，32只，随机分为4组，编号，每组8只。
2.2.2 给药 1组生理盐水空白对照组（按0.1mg/10g灌胃生理盐水），2组阿司匹林阳性对照组（按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林），3组元胡止痛片低剂量组（按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液），4组元胡止痛片高剂量组（按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液）。给药1h后给每组小鼠按0.1ml/10g腹腔注射0.6%的醋酸（临用前新鲜配制）。
2.2.3 观察 5min后记录15分钟内各小鼠出现“扭体反应”的次数。 3 结果
3.1热板法 表1 元胡止痛片对小鼠的痛阈影响（x?S，n=8）
* 100%
组别 生理盐水空白对
照组 阿司匹林阳性药
对照组 低浓度元胡止痛片对照组 高浓度元胡止痛片对照组
给药剂量给药60min后
给药15min后（s） 给药30min后（s） 给药90min后（s）
mg/10g （s）**
0.1
4 0.6 1.3
24.68 ±12.90
18.75 ±17.10
16.64±6.38
19.17±6.43
29.52 ± 19.42 23.61 ± 1.28 37.82 ±22.01
21.75 ±15.26 16.54± 9.85
20.96±8.69
15.76± 2.76* 23.81± 19.66
14.90±2.77* 30.72± 16.1018.73±3.81
23.85±18.25
**,60分钟时各组出现显著差异，p<0.01
*,1生理盐水空白对照组 vs 2阿司匹林阳性对照组，p<0.05*,1生理盐水空白对照组 vs 3低浓度元胡溶液组 ，
p<0.05
图1元胡止痛片给药60分钟后对小鼠热板法实验的镇痛作用的影响
3.2耳肿胀法
表3 元胡止痛片对小鼠的抗炎作用（x?S，n=8）
组别
生理盐水空白对照组
给药剂量mg/10g
0.1
阿司匹林阳性药对照组 4
肿胀率（%）
62±33
67±46
72±32
低浓度元胡止痛片对照组 0.6
高浓度元胡止痛片对照组
1.3
64± 50
图2 元胡止痛片对小鼠耳肿胀实验抗炎作用的影响
3.2醋酸扭体法
表 2元胡止痛片对小鼠的镇痛作用 （x?S，n=8）
组别
生理盐水空白对照组
给药剂量mg/10g
0.1
扭体次数*
15±18
2±3^
20±19
阿司匹林阳性药对照组 4
低浓度元胡止痛片对照组 0.6
高浓度元胡止痛片对照组
1.3
33±24
*,小鼠镇痛作用出现显著差异，p<0.05
^, 2阿司匹林阳性对照组 vs 4高浓度元胡溶液组
,p<0.05
篇三：药理实验方法学重点缩印
方法学
1.白细胞分化抗原群的检测方法P170 答：(1)免疫组化技术 先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成的有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。 (2)免疫荧光技术 根据抗原抗体反应的原理，现将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。
(3)流式细胞技术 使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微利捉个通过样品池，同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表向前散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号，经计算机处理形成相应的点图，直方图和加三维结构图像进行分析。
2.分析白细胞分化抗原检测的影响因素 流式法检测的影响因素：（1）非特异性结合NSB①Fc受体结合抗体是导致影响检测结果的重要因素，任何细胞上只要存在未结合的Fc受体，都可能有NSB。采用高浓度的纯化IgG可用于阻断Fc受体的NSB。②免疫球蛋白聚集可增加NSB。由于冰冻、复溶和冻干处理，抗体均可出现聚集。对于新购买的抗体，可通过高速离心去除聚集。
3.简述实验动物血压测定的方法。P140 一、直接测定法 1.麻醉动物直接测定法（1）麻醉动物直接测定法：麻醉、固定动物、手术视野剪毛、气管插管、动脉插管、血压记录；清醒动物直接测定法（2）简易清醒自由活动大鼠血压测定技术：导管制作、手术操作、连接测压系统、记录血压（生理记录仪记录）：（3）计算机化清醒自由活动大鼠血压测定技术：①采样 、记录和储存：压力信号经换能器转换为电信号，再经放大器输入计算机。②数据处理和结果分析：（4）清醒自由活动大鼠血压遥控测定技术 二、间接测定法 1.容积测定法 （1）大鼠尾容积测定法 大鼠尾根部加压超过收缩压时，血流中断，当压力降低到等于或稍低于收缩压时，血液流入尾部，此时的压力大于静脉压，血液回流受阻，结果尾容积加大，测定该容积突然增加时的瞬间压力，即为收缩压：（2）大鼠足容积测定法 同上；2..脉搏测定法 （1）大鼠尾动脉脉搏测定法 大鼠尾根部加压超过收缩压时，脉搏消失，压力减至收缩压时，脉搏出现，继续减压之舒张压时，脉搏回复加压前水平，检测这种脉搏变化时的瞬间压力，即得血压值。（2）犬颈动脉脉搏测压法 同上；（3）犬胫动脉脉搏测压法 同上（4）犬尾动脉脉搏测压法 同上
4.简述肾外包扎性高血压模型制备的基本原理和注意事项。P144
原理：肾外异物包扎，可致肾周围炎，在肾外形成一层纤维素性鞘膜，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素形成增加，进而使血液中血管紧张素含量增加，血压上升。 注意事项：（1）肾外包扎材料除自制双层乳胶薄膜和玻璃纸外，还可用绸布、乳胶、火棉胶等材料。肾外包扎材应足够紧，但不能勒破组织。（2）如果要制造2肾1扎型，则一侧肾包扎后无需切除另一侧肾，术后3~6月10%~20%动物形成高血压。如果要制造2肾2扎型，则一侧肾包扎后同法包扎另一侧肾，术后3~4周70%以上动物形成高血压。
5.试述区分中枢降压与外周降压的试验方法。P145
（1）脊髓猫实验 将猫在第二颈椎水平切断脊髓，施行人工呼吸，随后切断两侧迷走神经。如果给药后仍有降压作用，提示作用部位不在中枢，而在外周。如果给药后原有的降压作用消失，提示作用部位在中枢。
（2）降压有效量比较实验 如果以静脉注射最小有效降压计量的1/10量作椎动脉注射或侧脑室注射，仍可引起降压效应时，则可推测该受试药物降压作用为中枢性，否则尾外周性。
（3）交叉灌流实验 通过交叉灌流实验记录受血动物的血压及交感神经活动来分析药物的中枢性心血管作用。受血动物的头部血供由另一供血动物提供，在供血动物注射药物后，若药物通过中枢发挥作用，则受血动物会立即出现类似供血动物的心血管效应和交感神经活动的改变。 6.发热模型的建立与评价
1.基本原理：发热反应大多是各种致热因子作用于机体，产生和释放内热原，并进一步影响体温调节中枢，使调温起步点提高，体温相应升高。因此，实验室常用有关的刺激因子激活产生内热原。操作方法：1测量体温，系将肛表涂上凡士林，使其润滑后插入动物肛门，兔一般插入3-4cm，大
鼠插入2cm，放置3-5min后取出读数。2.引起发热反应包括（1）细菌培养液和内毒素引起的发热。①注射杀死的大肠埃希菌或乙型副伤寒沙门菌培养液②注射伤寒-副伤寒菌苗③注射腐败干草浸剂④注射大肠埃希菌菌液⑤注入伤寒沙门菌内毒素⑥应用啤酒酵母悬液（2）非感染性发热复制法1）化学刺激法：给兔背部注射松节油0.4ml/kg或2%2,4-二硝基酚乙醇溶液亦用1%角叉菜胶0.1ml，于大鼠一侧后足趾皮下注射2）注入异性蛋白给兔肌注10%蛋白栋，剂量1.0g/kg，可在2-3h内引起体温显著升高3）温刺激法（3）实验性发热反应的影响因素①动物特点的影响：不同种属、年龄和形态特征，对发热有明显影响②实验环境温度的影响：实验环境的温度能明显影响发热的反应速度和强度③实验动物活性的影响：体温实验时，必须考虑到动物的活动情况④致热物质的注入量和注射部位。
7.痛反应标准 1、 刺激强度和部位明确；2、有痛感
觉产生的潜伏期；3、反应优先发生于伤害性刺激痛觉感受范围内，可根据刺激强度对反应分级；4、痛反应的量化值必须能反应镇痛药的量效关系。
8.疼痛模型建立方法
1、化学刺激法：小鼠扭体法，钾离子皮下透入法，缓激肽动脉注射法，福尔马林实验 2、热刺激法：辐射热刺激法，小鼠热板法，小鼠热水缩尾法；
3、机械刺激法：大鼠尾尖部压痛法，小鼠尾根部加压法，后肢加压法（大鼠压足法） 4、电刺激法：1.大鼠牙髓刺激法 2.电刺激大鼠甩尾法 9.慢性疼痛模型
慢性疼痛法：1.大鼠关节炎痛 2.神经源性疼痛 3.坐骨神经痛 4.癌痛模型 10.镇痛药物作用部位分析
基本原理：1）微量给药，直接给药部位达有效浓度，而经血流稀释分布至其他部位时则浓度太低而无效；2）阻断或改变血流使药物不能进入某一部位或只能到达某一部位；3）切断部位之间解剖学联系；4）造成对称肢体痛阀差别，根据差别与部位的关系分析药物的作用部位。 1、 外周疼痛模型：大鼠单足致炎法
（中枢和外周疼痛模型），大鼠诱发肌电法，痛介质诱发隐神经传入放电法，兔耳静脉阻断法
2、 中枢疼痛模型：清醒小鼠鞘内注射
（脊髓），大鼠蛛网膜下腔插管法（脊髓），侧脑室给药法（中枢），脊髓化鼠模型（中枢），大鼠单足致炎法（中枢和外周）。
11.肝纤维化动物模型 1、CCL4诱发的肝纤维化动物模型原理CCL4
?肝?P450??酶?
CCL. 3+ CL.
启动脂质过氧化作用损伤肝细胞操作：SD大鼠、CCL4、花生油（高压灭菌）分组：正常组、模型组、不同剂量的受试药物组、阳性对照药组 背部皮下注射CCL42、异种血清诱发的肝纤维化动物模型 原理：异种血清进入动物体内引起免疫应答形成抗异种血清的抗体，长期刺激产生的免疫复合物来不及清除，沉积于肝脏的血管壁内外。操作：wistar雄大鼠、猪血清分组：同上 每只腹腔注射，，每次注0.5ml,每周
2次，16周
?
?给药组给予相应药物
血清，肝脏指标检查3、胆总管结扎致肝纤维化动物模型4、乙醇诱导的肝纤维化动物模型5、二甲基硝胺诱导的肝纤维化动物模型6、复合因素建立的肝纤维化动物模型
12.人外周血、DC分离培养及鉴定方法 培养流程：1、静脉新鲜抗凝血50ml 2、密度梯度离心获得单个核细胞 3、接种至6孔平底培养板中，置37度，5%二氧化碳培养箱吸弃细胞悬液，获得贴壁的单核细胞4、分离成功的单核细胞于每孔加入10%胎牛血清的1640完全培养基，重组人GM-CSF20ng/ml和IL-4 20ng/ml，于培养第3天半量换液同时加入全量细胞因子，于培养第5天全量换液，加入全量细胞因子，于培养第七天收获。鉴定方法：
13.要进行某药物的药效试验，观察其对血压的影响，应分别选用何种实验动物为好？
不能选择哪种动物？为什么
血压研究常用实验动物为大鼠、犬和猫，一般不宜使用兔作为血压实验，因为兔血压易波动，对药物反应与人相差较大。 14.MTT、CCK-8检测细胞增殖的基本原理和操作步骤
MTT法原理：活细胞线粒体酶还原成黄色，MTT为显蓝色的不溶于水的甲臜，死细胞此现象消失，MTT不被还原；DMSO溶解甲臜后，可通过酶标仪在参考波长450nm，检测波长570nm处测定其吸光度（OD值）。吸光度值与活细胞数成正比，因此可根据OD值推测出活细胞的数目，了解药物一直或杀伤肿瘤细胞的能力。 操作步骤：称取一定量MTT，加PBS或无血清培养基配置，用0.22um滤膜过滤，5mg/mlMTT液避光保存。接种细胞→24h→
溶剂对照组/待测实验组（五个稀释浓度）→培养结束前4h→每孔加MTT溶液20ul→37度孵育4h，吸弃上清→加DMSO→测定570nm OD值
计算:抑制率=[（对照组OD均值—给药组OD均值）/对照组OD均值]*100%
cck-8法原理：类似于MTT化合物，在电子耦合剂存在的情况下，可被线粒体脱氢酶还原成黄色的水溶性甲臜，生成甲臜数量与活细胞数成正比，活细胞增殖越快，颜色越深；细胞毒性越大，颜色越浅。操作：接种细胞于二氧化碳环境中培养24h→溶剂对照组/待测实验组（5个稀释浓度）→没空加cck-8溶液10ul→37度培养1至4小时→450nm处测OD值和计算抑制率。优点：1、加入cck-8可直接测定OD，简单方便，同时减少误差，尤其适用于悬浮细胞的培养。2、由于CCK-8量加入少，建议加完后轻敲培养板混匀。3、细胞种类不同，形成Formazan量也不同，如果显色不够可以继续培养。
15.Transwell侵袭实验的基本原理、操作步骤
原理：肿瘤侵袭基地膜被认为是转移发生过程中的一个重要环节，肿瘤细胞最初穿过基底膜是他们侵入淋巴系统或血床的开始，随后肿瘤细胞通过血行散播或淋巴转移进入靶器官/组织，最终形成转移灶。Matrigel是从一种富含细胞外基质蛋白的小鼠Engelbreth-Holm-Swarm肉瘤中提取的可溶性的基底膜。它主要包含层黏连蛋白IV型胶原、硫酸类肝素蛋白多糖等多种基底膜组分。
操作步骤：1)Matrigel胶包被小室的制备；2）胰酶消化法从培养瓶中获取细胞，用含1%FBS的培养基重悬细胞，使细胞浓度达到（1~5）×105个/ml；3）Matrigel侵袭分析；4）结晶紫染色法收集下室细胞，并统计迁移到下室的细胞数。
16请以豚鼠肺支气管灌流方法为例简述肾上腺素和苯海拉明的药理作用机制差异 基本原理：离体肺支气管灌流是通过观察药物对灌流液流出速率的影响，借以测定全部气道平滑肌的张力情况。若使灌流液流量增加，说明气道平滑肌张力减低，即该药有扩张平滑肌的作用。机制：（1）组胺激动H1受体和乙酰胆碱激动M受体都可导致平滑肌收缩。（2）苯海拉明对抗组胺H1受体竞争对平滑肌的影响不大。（3）异丙肾上腺素对抗乙酰胆碱和组胺对平滑肌的收缩作用是药理性对抗，作用比苯海拉明好。
17.简述肝微粒体的制备步骤
SD大鼠5只，实验前禁食12h，将大鼠断头处死，自门静脉注入0~4℃冰冷的磷酸盐缓冲液中，冲洗肝脏至土黄色，迅速取肝，再用磷酸盐缓冲液冲洗干净，称重。将肝组织剪碎，加入一定体积的0.1M磷酸盐缓冲液，于冰水浴中匀浆，并于4℃9000×g离心20min，取上清。此时上清即为S9部分。取该上清液，于100000×g离心60min。得下层沉淀即为肝微粒体，将沉淀物悬浮于含30%甘油的磷酸盐缓冲液，微粒体置-80℃冰箱内保存。 一．1.首过效应：
服给药后，药物在到达体循环之前，经肠道、肠壁和肝脏的代谢分解使进入生物体内的相对药量降低。2，判断方法：尾静脉给药AUC和门静脉给药AUC—比较判断肝首过—是—尾静脉》门静脉;门静脉给药和十二指肠给药AUC—比较判断肠首过—是—门静脉》十二指肠十二指肠和灌胃给药AUC—比较判断胃首过—是—十二指肠AUC》灌胃AUC
二、血压测定法 1. 直接测压法。1）麻醉动物直接测压法。2）清醒动物直接测压法。 2. 间接测压法。1）容积测压法。2）脉搏测压法。
三、（一）佐剂性关节炎 1.大鼠AA的制备：
用雄性Lewis、Wistar或SD大鼠，体重200g左右，将每鼠右后足趾皮内注射完全弗氏佐剂（CFA）0.1ml致炎。CFA是将卡介苗或死结合分枝杆菌加入已经高压灭菌的液体石蜡中，浓度为10mg/ml。原发病变主要表
现为早起致炎局部的炎症反应，致炎后18h右后足的肿胀达峰值，持续3d后逐渐减轻，8d后再度肿胀；继发病变一般出现于致炎后10d左右，表现为对侧和前肢的肿胀，耳和尾部出现“关节炎”小结，变应性角膜翳以及体重下降等等。 2.小鼠AA的制备：
用雄性C57BL/6小鼠，8周龄，4%氟烷吸入麻醉，左侧胫-跗关节皮下两点皮下注射100ulCFA，CFA浓度为5ug/ul，对照组同方法注射液状石蜡。造模后22d处死。造模24h内原发侧关节出现急性肿胀，第9天肿胀较严重。模型组穿格子数和活动度明显降低。造模后小鼠对于机械异常性疼痛和热痛出现明显退缩反应。
3 II型胶原诱导的关节炎1.小鼠CIA的制备：
鸡或牛II型胶原（CII）溶解于0.01mol/L的醋酸后与同等容积的含有低浓度卡介苗的液体石蜡油（ALCB）充分乳化，CII和ALCB的计量均为4mg/mL.,乳化在冰浴中进行。在小鼠（18g左右）根部多点皮内注射乳化剂0.1ml，第21d在尾根部加强注射。加强注射后，由第三者检查关节炎的发生情况。 4 大鼠CIA的制备：
II溶解于0.01mol/L的醋酸中（CII终浓度为4mg/ml），充分研磨，4度过夜，讲CII溶液滴加至冷的不完全弗氏佐剂（IFA）中，等体积混合，充分乳化。大鼠（体重150g左右）尾根部和背部分多点皮内注射0.1mLCII乳化剂。7d后同法再坚强注射一次。对照组注射0.01mol/L醋酸和IFA的乳化液。从第20d后开始，用组织测量仪测定后足趾的容积。评价指标：足趾肿胀度、全身表现评分、关节肿胀数、关节炎指数、X线评分、关节炎病理评分。
关节炎指数：每只足爪按下列标准评分。0=正常1=踝关节出现红斑和轻微肿胀2=踝关节到跖关节或掌关节红斑和轻微肿胀3=踝关节到跖关节或掌关节出现红斑和中度肿胀4=踝关节到跖关节或掌关节红斑和重度肿胀
四、祛痰药的药理试验方法 1).呼吸道分泌液量测定法
小鼠酚红实验法,基本原理：利用酚红小鼠腹腔注射后部分从气道排泄的特点，测定小鼠气道酚红排泄量，以判断受试药对气道通透性和分泌液量的影响.操作步骤：小鼠饥饿16-18h--注射酚红前30min受试药物灌胃--腹腔注射酚红药物，30min 后处死--血凝后，分离气管、气管插管并与注射器相连--用5% NaHco3 0.8ml 洗气管，反复三次--合并洗液，放置，得透明红色上清液，用分光光度计波长545nm比色，根据酚红标准曲线计算出酚红量。注意事项：1.待小鼠体内血液凝固后，再切开颈部，以免血液中酚红影响。2.气道内注入NaHco3溶液后吸出时要轻轻进行，一旦用力过度，肺泡会破裂液体流入胸腔。 )呼吸道纤毛运动实验法---鸽纤毛运动实验法 原理：利用气管纤毛运动带动颗粒物从气管内固定的向口腔方向的速度，测定药物祛痰药物，一般测运动2cm所需的时间.操作步骤：鸽气管分离，做2cm的标记---切开气管，将软木屑放在2cm向心端--记录2cm所需时间，观察给药前后0.5h的速度，正常是3-4min。注意事项：鸽气管暴露实验注意温度，等待时颈部用生理盐水湿润纱布防治干燥.
)豚鼠气道黏液黏多糖的测定.原理：气道黏液主要由杯细胞和黏液性腺细胞产生和分泌，内含黏蛋白，为黏多糖和蛋白质。无机酸存在下，己糖醛酸从黏多糖中释放与咔唑起缩合反应，形成有色物，在530nm比色测定.操作：豚鼠麻醉处死，取气管称重----剪开气管用棉棒取黏液--水洗，离心，取上清液待用--上清加四硼酸-浓硫酸溶液，沸水加热15min--用分光光度计530nm比色。
大鼠气道黏液中肺表面活性物质的测定.原理：肺表面活性物质（ps）由脂质和蛋白质组成，其中约90%是脂质，且绝大部分是定磷脂，因此磷脂的定量即可反应ps的多少。操作：制取支气管肺泡灌洗液--肺表面活性物质的测定---置620nm波长比色法定量。
五、镇痛药的药效实验方法？具体有哪些实验方法？
类：化学刺激法，热刺激法，电刺激法，
机械刺激法，慢性疼痛法、化学刺激法：1.小鼠扭体法 2.钾离子皮下透过法 3.缓激肽动脉注射法 4.福尔马林实验。热刺激法：1.辐射热刺激法 2.小鼠热板法 3.小鼠热水缩尾法 电刺激法：1.大鼠牙髓刺激法 2.电刺激大鼠甩尾法。机械刺激法：1大鼠尾尖部压痛法 2.小鼠尾根部、后肢加压法 3.大鼠压足法 慢性疼痛法：1.大鼠关节炎痛 2.神经源性疼痛 3.坐骨神经痛 4.癌痛模型 六、肝纤维化模型
1、CCL4诱发的肝纤维化动物模型原理CCL
4
CCL.
3+ CL. 启动脂质过氧化作用损伤肝细胞 操作：SD大鼠、CCL4、花生油（高压灭菌）分组：正常组、模型组、不同剂量的受试药物组、阳性对照药组 背部皮下注射CCL42、异种血清诱发的肝纤维化动物模型 原理：异种血清进入动物体内引起免疫应答形成抗异种血清的抗体，长期刺激产生的免疫复合物来不及清除，沉积于肝脏的血管壁内外。操作：wistar雄大鼠、猪血清分组：同上 每只腹腔注射，，每次注0.5ml,每周2次，16周
给药组给予相应药物
血清，肝脏指标检查3、胆总管结扎致肝纤维化动物模型4、乙醇诱导的肝纤维化动物模型5、二甲基硝胺诱导的肝纤维化动物模型6、复合因素建立的肝纤维化动物模型
七、发热模型、
.基本原理：发热反应大多是各种致热因子作用于机体，产生和释放内热原，并进一步影响体温调节中枢，使调温起步点提高，体温相应升高。因此，实验室常用有关的刺激因子激活产生内热原。操作方法：1测量体温，系将肛表涂上凡士林，使其润滑后插入动物肛门，兔一般插入3-4cm，大鼠插入2cm，放置3-5min后取出读数。 .引起发热反应包括（1）细菌培养液和内毒素引起的发热。1）注射杀死的大肠埃希菌或乙型副伤寒沙门菌培养液2）注射伤寒-副伤寒菌苗3）注射腐败干草浸剂4）注射大肠埃希菌菌液5）注入伤寒沙门菌内毒素6）应用啤酒酵母悬液（2）非感染性发热复制法1）化学刺激法：给兔背部注射松节油0.4ml/kg或2%2,4-二硝基酚乙醇溶液亦用1%角叉菜胶0.1ml，于大鼠一侧后足趾皮下注射2）注入异性蛋白给兔肌注10%蛋白栋，剂量1.0g/kg，可在2-3h内引起体温显著升高3）温刺激法（3）实验性发热反应的影响因素1）动物特点的影响：不同种属、年龄和形态特征，对发热有明显影响2）实验环境温度的影响：实验环境的温度能明显影响发热的反应速度和强度3）实验动物活性的影响：体温实验时，必须考虑到动物的活动情况4）致热物质的注入量和注射部位。
八、抗抑郁药模型
、应激模型a.大、小鼠强迫游泳实验 动物在恶劣环境下会出现逃逸行为，当不能逃逸时便出现行为绝望。大鼠强迫游泳实验是利用行为绝望建立的一种能有效的抗抑郁药的大鼠抑郁模型。b.小鼠悬尾法 是一种急性行为绝望模型，将小鼠倒挂后，其行为首先是拼命挣扎，企图逃脱，最后进入绝望而静止不动。大多数抗抑郁药可以明显缩短其不动时间。c.慢性不可预知性应激实验
2.大鼠嗅球切除模型大鼠嗅球切除后许多行为发生改变，如自发活动增加，被动学习能力欠缺等，均可以被抗抑郁剂所逆转。 3.药物诱发的抑郁模型 （利血平、5-HTP、色胺）利血平拮抗实验:利血平是一种囊泡再摄取抑制剂，他使递质留在囊泡外，易被单胺氧化酶降解，从而使单胺，儿茶酚胺耗尽，动物出现上眼睑下垂、体温下降及强直症状，抗抑郁药能拮抗上述症状。5-HTP诱导的甩头行为 大鼠色胺惊厥增强实验
4.大鼠隔离残杀行为模型、脑卒中后抑郁模型
九、如何从脾脏中取T细胞
净台内无菌取小鼠脾脏，将脾脏转入pbs中，研磨制成单细胞悬液，，另取无菌试管，先加入淋巴细胞分离液，然后加入制备的细胞悬液，离心，分层，吸出单个核细胞层在另外无菌试管中，用红细胞裂解液处理，以除去红细胞，离心，弃上清，采用尼龙毛柱法：混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时，B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上，
而多数T细胞则通过尼龙毛柱，将注射器固定在支架上，倒入37℃的细胞培养液，关闭阀门一定时间，然后打开阀门，放掉细胞培养液，以清洗几次尼龙毛，关上阀门。将要分离的细胞液用预先加温的培养液稀释成适当的浓度，约5.00×107个细胞／ml。将细胞液倒入注射器内，使之没过尼龙毛柱。盖上注射器，37℃温育45min至1h。打开下口，缓慢放流，收集于离心管中。离心，即获所需的T淋巴细胞。 十、肿瘤细胞的培养：
瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤细胞与体内正常细胞相比，不论在体内或在体外，在形态、生长增值、遗传性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿瘤细胞和在体外培养的肿瘤细胞，其差异较小，但也并非完全相同。培养中的肿瘤细胞具以下突出特点：－）形态和性状培养中癌细胞无光学显微镜下特异形态，大多数肿瘤细胞镜下观察比二倍体细胞清晰，核膜、核仁轮廓明显，核糖体颗粒丰富。电镜观察癌细胞表面的微绒毛多而细密，微丝走行不如正常细胞规则，可能与肿瘤细胞具有不定向运动和锚着不依赖性有关。二）生长增殖 肿瘤细胞在体内具有不受控增殖性，在体外培养中仍如此。正常二倍体细胞在体外培养中不加血清不能增殖，是因血清中含有很细胞增殖生长的因子，而癌细胞在低血清中（2%～5%）仍能生长。已证明肿瘤细胞有自泌或内泌性产生促增殖因子能力。正常细胞发生转化后，出现能在低血清培养基中生长的现象，已成为检测细胞恶变的一个指标。癌细胞或培养中发生恶性转化后的单个细胞培养时，形成集落（克隆）的能力比正常细胞强。另外癌细胞增殖数量增多扩展时，接触抑制消除，细胞能相互重叠向三维空间发展，形成堆积物。三）永生性 永生性也称不死性。在体外培养中表现为细胞可无限传代而不凋亡（Apoptosis）。体外培养中的肿瘤细胞系或细胞株都表现有这种性状，体内肿瘤细胞是否如此尚无直接证明。四）浸润性 浸润性是肿瘤细胞扩张性增殖行为，培养癌细胞仍持有这种性状。在与正常组织混合培养时，能浸润入其它组织细胞中，并有穿透人工隔膜生长的能力。五）异质性 所有肿瘤都是由有增殖能力、遗传性、起源、周期状态等性状不同的细胞组成。异质性构成同一肿瘤内细胞的活力有差别的瘤组织；处于瘤体周边区的细胞获得血液供应多，增殖旺盛，中心区有的细胞衰老退化，有的处于周期阻滞状态，那些呈活跃增殖状态的细胞称干细胞（Stem Cells）、只有这些干细胞才是支持肿瘤生长的成分。六）其它 肿瘤细胞在体外不易生长的原因可能由于：①依赖性：肿瘤细胞虽有较强克隆生长力，但仍有一定的群体性或与其它细胞相依存关系。一是肿瘤细胞与肿瘤细胞的相互依存，二是肿瘤细胞与基质成纤维细胞的依赖。体外分散培养和排除成纤维细胞后也会同时消除或减弱这些依存关系，可能影响癌细胞增殖生长的活性；②肿瘤细胞的自泌也会因分散培养而被稀释，达不到肿瘤生长的需求，降低肿瘤细胞的生长增殖力；③并非所有肿瘤细胞都有强的生长活力和长的Life Span，只有干细胞才有强的增殖生长能力，但这些细胞数量很少；④离体培养肿瘤细胞可能需求与体内相似的特殊生存条件。 十一、实验动物的肿瘤模型可以概括地区分为下面四类：
（一）自发性肿瘤模型 实验动物种群中不经有意识的人工实验处置而自然发生的一类肿瘤称之为自发性肿瘤。自发性肿瘤发生的类型和发病率可随实验动物的种属、品系及类型的不同而各有差异。肿瘤实验研究中选用自发性肿瘤型为对象进行研究有一定优点：首先是自发性肿瘤通常比用实验方法诱发的肿瘤与人类所患的肿瘤更为相似，有利于将动物实验结果推用到人：其次是这一类肿瘤发生的条件比较自然，有可能通过细致观察和统计分析而发现原来没有发现的环境的或其它的致癌因素，可以着重观察遗传因素在肿瘤发生上的作用。但应用自发性肿瘤模型也存在一些缺点：肿瘤的发生情况可能参差不齐，不可能在短时间内获得大量肿瘤学材料，观察时间可能较长，实验耗费较大。
（二）诱发性肿瘤模型 用化学致癌物、射线或病毒均可在各类动物中诱发不同类型的肿瘤。在使用化学致癌致癌时，要注意
各类化学致癌剂对动物致癌的特点，致癌的诱癌过程需时较长，成功率多数达不到100%，肿瘤发生的潜伏期个体变异较大，不易同时获得病程或癌块大小较均一的动物供实验治疗之用，再加之肿瘤细胞的形态学特征常是多种多样，且致癌多瘤病毒常诱发多部位肿瘤，故不常用于药物筛选，但从病因学角度分析，它与人体肿瘤较为近似，故此模型常用于特定的深入研究。由于该类型肿瘤生长较慢，瘤细胞增殖比率低，倍增时间长，更类似于人肿瘤细胞动力学特征，常用于综合化疗或肿瘤预防方面的研究。
三）移植性肿瘤模型 目前肿瘤化疗所应用的大多数药物，都经动物移植性肿瘤试验而被发现，因此它是筛选抗肿瘤新药中最常用的模型。其优点是接种一定量瘤细胞或无细胞滤液（病毒性肿瘤）后，可以使一群动物带有同样的肿瘤，生长速率较一致，个体差异较小，接种存活率近100%。地宿主的影响也类似，易于客观判断疗效，且可在同种或同品系动物中连续移植，长期保留供试验之用，试验周期一般均较短，因此当前抗癌药筛选中绝大多数用移植瘤试验，如各种体型实肿瘤，腹水瘤和白血病等均被广泛使用。但是这类肿瘤生长速度快，增殖比率高，体积倍增时间短，这些都是与人体肿瘤的显著不同点，特别是与人的实体瘤差别更大。
四）人体肿瘤的异种移植性肿瘤模型 将人体肿瘤移植于免疫缺陷动物，因能保持其生物学性，用于研究人体肿瘤对药物的敏感性有较大的帮助，当前日益受到多方面的重视。 ? 皮内注射法与皮下注射法的区别
1：皮下注射法注入，注入皮下组织的方法，使针头斜面向上，和皮肤呈30到40度角抽取无血液，即可注射。2.皮内注射法：注入表皮和真皮之间的方法。使针头斜面向上，和皮肤呈15度刺入皮内，局部形成一圆形隆起的皮丘，皮肤变白，毛孔粗大。 两种不同的免疫途径，根据实验需要进行皮内或皮下注射。皮内注射时不能注射到皮下，否则会引起严重深
AIA（抗原性关节炎）和CIA的 区别
1发病机制不同2诱导模型方式不同3发病特点不同；AA发病周期短，具有自限性；CIA周期长，关节和骨破坏严重。4AA常用的是大鼠Lewis大鼠，CIA常用的小鼠是DBA/1小鼠；5CIA更接近RA，主要表现在细胞免疫和体液免疫；发病特点：抗胶原自身免疫的产生和病理破坏特点
十四、请以豚鼠肺支气管灌流法为例简述异丙肾上腺素和苯海拉明的药理作用机制。 组胺激动H1受体和乙酰胆碱激动M受体都可以导致平滑肌收缩，苯海拉明对抗组胺H1受体竞争对平滑肌的影响不大，异丙肾上腺素对抗乙酰胆碱和组胺对平滑肌的收缩作用是药理性对抗，作用比苯海拉明好。